近日,,科學(xué)實(shí)驗(yàn)中心細(xì)胞與影像平臺(tái)流式小組利用BD FACSCanto Plus流式細(xì)胞儀成功完成一例小鼠脾臟和肝臟組織細(xì)胞免疫分型的十色流式細(xì)胞分析實(shí)驗(yàn),流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)服務(wù)技術(shù)再上新臺(tái)階,。
流式細(xì)胞術(shù)具有快速對(duì)單個(gè)細(xì)胞內(nèi)多因子表達(dá)情況的檢測(cè)能力,在淋巴細(xì)胞分型分析實(shí)驗(yàn)中,,為了將不同種類的淋巴細(xì)胞篩選出來,,需對(duì)不同細(xì)胞表面標(biāo)記物、胞內(nèi)和核內(nèi)的檢測(cè)指標(biāo)熒光抗體進(jìn)行共孵育,,從而通過流式細(xì)胞儀一次性檢測(cè)多種因子(多色流式分析技術(shù)),。高通量的多色流式分析技術(shù)與常規(guī)流式分析技術(shù)(6 色以下)相比有明顯優(yōu)勢(shì):其不僅能提高識(shí)別微粒的準(zhǔn)確性,而且處理的管數(shù)減少,,節(jié)約了樣本及抗體用量,、上樣檢測(cè)及處理樣本時(shí)間,能更有效地計(jì)數(shù)大量微粒,,并便于實(shí)驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)化,。
理論上多色流式分析技術(shù)檢測(cè)指標(biāo)數(shù)量上限只與流式細(xì)胞儀熒光通道數(shù)量有關(guān)。但在實(shí)際操作過程中,,由于不同指標(biāo)所用細(xì)胞抗體之間的相互作用以及不同熒光檢測(cè)通道的串色因素的影響,,使得復(fù)雜配色熒光的流式細(xì)胞術(shù)實(shí)驗(yàn)存在一定的技術(shù)難點(diǎn)。此前我中心對(duì)免疫細(xì)胞分型分析的多色流式細(xì)胞實(shí)驗(yàn)多采用4-6色熒光的檢測(cè)方案,。此次中心流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)小組突破瓶頸,,通過幾天的技術(shù)攻關(guān),,攻克了熒光染料配色方案、電壓優(yōu)化,,補(bǔ)償調(diào)節(jié)等多項(xiàng)技術(shù)難關(guān),,成功完成了兩批次共計(jì)84份小鼠脾臟和肝臟組織樣本的細(xì)胞免疫分型十色流式細(xì)胞分析實(shí)驗(yàn),事后進(jìn)行了妥善的數(shù)據(jù)處理,。實(shí)驗(yàn)結(jié)果達(dá)到預(yù)期,,獲得了用戶的一致好評(píng)。
本次組織樣本的細(xì)胞免疫分型十色流式細(xì)胞分析實(shí)驗(yàn)的成功,,達(dá)到了中心現(xiàn)有流式細(xì)胞儀的檢測(cè)通道數(shù)量上限,,科學(xué)實(shí)驗(yàn)中心流式細(xì)胞儀平臺(tái)充分挖掘了儀器潛能,建立了完善的標(biāo)準(zhǔn)化檢測(cè)方法體系,,以期待更好的為桂林醫(yī)學(xué)院廣大師生科研項(xiàng)目提供助力,。
(文/方慶勵(lì) 審核/沈輝)