“ 針對最近的某熱點事件”,希望大家在做實驗時候都能夠注意安全,,保護好自己的同時,盡早獲得需要的實驗數(shù)據(jù),早日畢業(yè)!今天本文特地總結一下在實驗室容易碰到的有毒試劑及防護措施,,請大家多多轉(zhuǎn)發(fā)給做實驗的小伙伴們。
實驗室人身安全問題,,永遠是擺在第一位的,。實驗室很多試劑是有毒的,而說實話,,很多實驗室并沒有對新人專門培訓,,都是師兄師姐“傳幫帶”。實驗室有毒的化學試劑可多了,,一不小心就在無形中影響了免疫系統(tǒng),、神經(jīng)系統(tǒng)等,因此留意哪些是“敵人”,,以及如何應對非常重要,。
毒物進人體內(nèi)主要有以下幾種形式:
1.經(jīng)皮膚粘膜吸收
2.經(jīng)呼吸道吸入
3.經(jīng)胃腸道進入
4.經(jīng)眼、耳,、胸膜腔,、直腸等進入
5.經(jīng)皮下注射、靜脈注射等進入
1 核酸提取及PCR等實驗
1.1 苯(Benzene) 和 二甲苯(Xylene)
苯,,是芳香烴,,在常溫為易燃、易揮發(fā),、氣味刺鼻,、無色液體。苯有劇毒,,苯是最簡單的芳香烴,,難溶于水,易溶于有機溶劑,,本身也可作有機溶劑,。二甲苯為無色透明液體,與乙醇,、氯仿或乙醚能任意混合,,在水中不溶,二甲苯毒性中等。這兩種化合物都被認為是致癌物質(zhì),,特別是長期暴露于高濃度下可能增加罹患白血病等癌癥的風險。在使用這些溶劑時,,應在通風好的環(huán)境下操作,,并佩戴適當?shù)膫€人防護裝備,如手套和呼吸面具,。
1.2 Trizol
用途:Trizol是一種新型總RNA抽提試劑,,可以直接從細胞或組織中提取總RNA。其含有苯酚,、異硫氰酸胍等物質(zhì),,能迅速破碎細胞并抑制細胞釋放出的核酸酶。TRIZOL的主要成分是苯酚,。
危險性:雖然它不是直接的致癌物質(zhì),,但Trizol試劑含有毒物質(zhì)苯酚,若皮膚不慎接觸Trizol,,應立即用大量去垢劑和水沖洗,,如仍有不適,應咨詢并聽取醫(yī)生意見,。
防護措施:當使用TRIzol試劑工作時,,應使用手套,并保護眼睛(屏蔽,、安全護目鏡),。避免與皮膚或衣服接觸, 使用化學通風櫥,,避免吸入蒸氣,。
1.3 酚(Phenol)
酚也具有毒性,對皮膚,、粘膜有強烈的腐蝕作用,也可抑制中樞神經(jīng)系統(tǒng)或損害肝,、腎功能。在處理酚時,,需要小心避免皮膚接觸,,佩戴適當?shù)姆雷o裝備,如手套和護目鏡,。
防護措施:呼吸系統(tǒng)防護:可能接觸其粉塵時,,佩戴自吸過濾式防塵口罩。 緊急事態(tài)搶救或撤離時,,佩戴自給式呼吸器,。 眼睛防護:戴化學安全防護眼鏡。 防護服:穿透氣型防毒服,。
1.4 DEPC 焦碳酸二乙酯
用途:焦碳酸二乙酯是一種強烈但不徹底的RNA酶抑制劑,,通過和RNA酶的活性基團組氨酸的咪唑環(huán)結合使蛋白質(zhì)變性,,從而抑制酶的活性,常用于生物實驗中RNA的提取等,,是一種潛在的致癌物質(zhì),。DEPC是RNA酶的化學修飾劑,它和RNA酶的活性基團組氨酸的咪唑環(huán)反應而抑制酶活性,。DEPC與氨水溶液混合會產(chǎn)生致癌物,,因而使用時需小心。DEPC能與胺和巰基反應,,因而含Tris和DTT的試劑不能用DEPC處理,。
防護措施:在使用DEPC時,需要小心遵守操作指南,,避免皮膚接觸和吸入,,以確保RNA樣品的質(zhì)量。開啟時瓶口不要指向操作者或其他人,,瓶內(nèi)壓可導致噴濺,。戴好手套并穿實驗室工作服,在通風櫥內(nèi)操作,。不小心沾到手上注意立即沖洗,。
1.5 TCA 三氯乙酸
用途:三氯乙酸,又名三氯醋酸,,是一種有機化合物,,有刺激性氣味,易潮解,,溶于水,、乙醇、乙醚 ,。主要用于有機合成和制備醫(yī)藥,、也可用作化學試劑、殺蟲劑,。三氯乙酸在低于蛋白質(zhì)等電點的PH值時,,酸根與帶正點荷的蛋白質(zhì)形成不溶性鹽而沉淀。作為蛋白質(zhì)變性劑使蛋白質(zhì)構象發(fā)生改變,,暴露出較多的疏水性基團,,使之聚集沉淀。三氯乙酸可以有效地破壞細胞膜和核膜,,并純化DNA,,使其適合于后續(xù)的分子生物學實驗,如PCR、限制性酶切和測序等,。
危險性:TCA三氯乙酸有很強的腐蝕性,。
防護措施:配戴合適的手套和安全護目鏡。
1.6 氯仿(Chloroform)
用途:氯仿為無色透明液體,,有特殊氣味,,味甜,高折光,,不燃,質(zhì)重,,易揮發(fā),。對光敏感,遇光照會與空氣中的氧作用,,逐漸分解而生成劇毒的光氣(碳酰氯)和氯化氫,。氯仿可以用作萃取劑,用于分離和提取生物樣品中的有機物,。其次,氯仿還可以用作抑制劑,用于抑制生物反應中的某些酶的活性,。氯仿還可以用作溶劑,用于溶解生物樣品或化合物。
危險性:氯仿是一種揮發(fā)性有機溶劑,,長期或高濃度暴露可能對健康產(chǎn)生危害,。在光照下遇空氣逐漸被氧化生成劇毒的光氣,故需保存在密封的棕色瓶中,。它對中樞神經(jīng)系統(tǒng)具有毒性,。三氯甲烷(氯仿)對皮膚、眼睛,、黏膜和呼吸道有刺激作用,。它是一種致癌劑,可損害肝和腎,。三氯甲烷易揮發(fā),,應避免吸入揮發(fā)氣體。
防護措施:在使用氯仿時,,需要采取適當?shù)陌踩胧?,戴好手套和護目鏡,如在通風良好的實驗室中操作,,佩戴適當?shù)膫€人防護裝備,,避免吸入蒸汽。
2 細胞培養(yǎng)
2.1 紫外光或紫外線
紫外線是一種低能量的電磁輻射,,可殺死多種微生物,。紫外線的直接作用是通過破壞微生物的核酸及蛋白質(zhì)等而使其滅活,間接作用是通過紫外線照射產(chǎn)生的臭氧殺死微生物。直接照射培養(yǎng)室消毒,,用法簡單,,效果好。
危險性:紫外光或紫外線可損傷眼視網(wǎng)膜,。在實驗室里常用的紫外光源包括手提式紫外燈和紫外透射儀,。只有通過吸收有害波長的濾片或安全玻璃片才可觀察。紫外線會引發(fā)誘變和致癌,。
防護措施:切勿用裸眼觀察沒有防護裝置的紫外光源,。在紫外光下操作時要佩戴合適的預防性手套。
2.2 二甲基亞砜(DMSO,,Dimethyl Sulfoxide)
二甲基亞砜(DMSO)是一種含硫有機化合物,,常溫下為無色無臭的透明液體,是一種吸濕性的可燃液體,,能溶于乙醇,、丙醇、苯和氯仿等大多數(shù)有機物,,被譽為“萬能溶劑”,。
用途:DMSO用途廣泛,可作有機溶劑,、反應介質(zhì)和有機合成中間體,。也可用作合成纖維的染 色溶劑、去染劑,、染色載體以及回收乙炔,、二氧化硫的吸收劑,也是一種滲透性保護劑,,能夠降低細胞冰點,,減少冰晶的形成,減輕自由基對細胞損害,,改變生物膜對電解質(zhì),、藥物、毒物和代謝產(chǎn)物的通透性,。
DMSO存在嚴重的毒性作用,,它會與蛋白質(zhì)疏水基團發(fā)生作用,導致蛋白質(zhì)變性,,具有血管毒性和肝腎毒性,。
防護措施:用的時候要避免其揮發(fā),吸入,,攝入,,皮膚吸收可造成傷害,,因此需要準備1%-5%的氨水備用。戴好手套和護目鏡,,在通風櫥內(nèi)操作,。若皮膚不慎沾上后,可用大量的清水及稀氨水沖洗,。DMSO為可燃物保存于密封容器中,。遠離熱源、火花和明火,。
3 蛋白電泳類
3.1 SDS 十二烷基硫酸鈉
用途:十二烷基硫酸鈉,,是一種有機化合物,易溶于水,,對堿和硬水不敏感,,具有去污、乳化和優(yōu)異的發(fā)泡力,,是一種對人體微毒的陰離子表面活性劑,其生物降解度>90%,。實驗室中常用于SDS-PAGE電泳凝膠配置,,用于分離蛋白質(zhì)。
SDS危險性:SDS十二烷基硫酸鈉有毒,,它是一種刺激物,,對粘膜和上呼吸道有刺激作用,對眼和皮膚有刺激作用,,可引起呼吸系統(tǒng)過敏性反應,。
安全操作:佩戴適當?shù)膫€人防護裝備,如實驗室外套,、手套和護目鏡,。在制備SDS-PAGE凝膠時,盡量避免吸入SDS粉末,。確保在通風良好的實驗室中操作,,以減少SDS的懸浮粉塵。
3.2 TEMED 四甲基乙二胺
用途:四甲基乙二胺是一種無色透明的液體,,可混溶于乙醇及多數(shù)有機溶劑,,有微腥臭味,是強神經(jīng)毒劑,。在分子生物學中,,可以用于配制SDS-PAGE膠。TEMED可以催化APS產(chǎn)生自由基,,從而加速聚丙烯酰胺凝膠的聚合,,作為一種促凝劑使用 ,,通常用于SDS-PAGE凝膠配置。
危險性:TEMED具有強烈的神經(jīng)毒性,,可引起呼吸道刺激和神經(jīng)系統(tǒng)損傷,。
安全操作:在使用TEMED時,必須在通風良好的實驗室環(huán)境中操作,。避免直接接觸皮膚和眼睛,,戴化學安全防護眼鏡,戴橡膠手套,。 身體防護:穿防毒物滲透工作服,。此外,應小心處理TEMED,,以減少揮發(fā)性暴露,。防止誤吸,快速操作,,密封存放,。
3.3 PMSF 苯甲基磺酰氟
用途:苯甲基磺酰氟,是一種有機化合物,,是一種絲氨酸蛋白酶抑制劑,,在生物化學和分子生物學實驗領域,常被用來制備細胞裂解液,,用于蛋白提取,。可抑制絲氨酸蛋白酶例如胰蛋白酶和胰凝乳蛋白酶,也可抑制半胱氨酸蛋白酶和乙酰膽堿酯酶,。
危險性:苯甲基磺酰氟是一種高強度毒性的膽堿酯酶抑制劑,。它對呼吸道黏膜、眼睛和皮膚有很大的破壞性,??梢蛭搿⒀氏禄蚱つw吸收而受到致命傷害,。
防護措施:戴合適的手套和安全眼鏡,,始終在化學通風櫥里使用。與人體接觸后,, 要立即用大量的水沖洗眼睛或皮膚,,并將已污染的工作服丟棄。
3.4 Acrylamide 丙烯酰胺(未聚合)
用途:丙烯酰胺為丙烯酰胺系中最重要及最簡單的一種,,用途十分廣泛,,用于制備蛋白電泳凝膠的原料。
危險性:可通過皮膚吸收或呼吸道進入人體,。未聚合丙烯酰胺的危害主要是引起神經(jīng)毒性,,同時還有生殖,、發(fā)育毒性。神經(jīng)毒性作用表現(xiàn)為周圍神經(jīng)和腦中涉及學習,、記憶和其他認知功能部位的退行性變化,,試驗還顯示丙烯酰胺是一種可能致癌物,累積毒性,,不容易排毒,。
安全操作:在操作和使用中必須穿戴好防護用具,如防毒服,,防毒口罩及防毒手套等,,以減少暴露風險。確保在通風良好的實驗室中操作,。
3.5 N,N'-亞甲基雙丙烯酰胺
N,N'-亞甲基雙丙烯酰胺,,白色粉末狀結晶,無氣味,,吸濕性極小,。對光敏感。NN-亞甲基雙丙烯酰胺有毒,,會影響中樞神經(jīng)系統(tǒng),。
防護措施:切勿吸入該粉末,如吸入,,立即呼吸新鮮空氣,如有不適,,立即就醫(yī),。如碰入眼睛,立即睜開眼睛,,用流水沖洗幾分鐘,。
3.6 APS 過硫酸銨
用途:過硫酸銨也稱過二硫酸銨,是一種銨鹽,,有強氧化性和腐蝕性,。被廣泛地用于蓄電池工業(yè),在實驗室中主要用于DNA和RNA的電泳分離,。電泳是一種將DNA或RNA分離的技術,,它利用電場將DNA或RNA分子移動到不同的位置。過硫酸銨可以作為電泳緩沖液的一部分,,幫助DNA或RNA分子在電泳過程中移動,。
危險性:APS對對皮膚粘膜有刺激性和腐蝕性。吸入后引起鼻炎,、喉炎,、氣短和咳嗽等,。眼、皮膚接觸可引起強烈刺激,、疼痛甚至灼傷,。長期皮膚接觸可引起變應性皮炎。
防護措施:操作時應配戴合適的手套,、安全眼鏡和防護服,。始終在通風櫥里操作,操作完后及時清洗雙手,。
3.7 DTT 二硫蘇糖醇
用途:二硫蘇糖醇是一種小分子有機還原劑,。在DNA溶液中加入DTT,可以降低DNA的二聚化,。用于蛋白質(zhì)中二硫鍵的還原,,可用于阻止蛋白質(zhì)中的半胱氨酸之間所形成的蛋白質(zhì)分子內(nèi)或分子間二硫鍵。
危險性:DTT是一種小分子有機還原劑,,會散發(fā)難聞的氣味,,主要是對呼吸道黏膜,皮膚有刺激作用。
防護措施:操作時應戴手套和護目鏡,,在通風櫥中操作,。
4 組織固定、染色類
4.1 Triton X-100 聚乙二醇辛基苯基醚
用途:聚乙二醇辛基苯基醚是有機高分子化合物,,是一種非離子型表面活性劑(或稱去污劑),。為無色或幾乎無色透明黏稠液體。常用的通透試劑,可以通透細胞膜和核膜,作用的原理也是非特異性地溶解細胞膜,因此其缺點是不利于膜蛋白的檢測,但當使用多聚甲醛進行交聯(lián)和固定后,相當一部分膜蛋白會被交聯(lián)固定,從而不會被Triton X-100溶解,因此后續(xù)仍然能檢測到,。
危險性:Triton X-100會引起嚴重的眼睛刺激和灼傷,。可因吸入,、咽下或皮膚吸收而損害身體健康 ,。
防護措施:配戴合適的手套和護目鏡。
4.2 HCHO 甲醛
甲醛俗稱福爾馬林,,是無色,、具有強烈氣味的刺激性氣體,其35%~40%的水溶液通稱福爾馬林,。甲醛有很大的毒性并易揮發(fā),,能與蛋白質(zhì)結合,是一種致癌劑,。吸入高濃度甲醛后,,會出現(xiàn)呼吸道的嚴重刺激和水腫、眼刺痛,、頭痛,,也可發(fā)生支氣管哮喘,。皮膚直接接觸甲醛,可引起皮炎,、色斑,、壞死。
防護措施:避免吸入其揮發(fā)的汽霧,。要戴合適的手套和安全眼鏡,。始終在化學通風櫥內(nèi)進行操作。遠離熱,、火花及明火,。
4.3 Giemsa 吉姆薩
用途:吉姆薩染液本染色液最適于血液涂抹標本、血球,、瘧原蟲,、立克次體以及骨髓細胞、脊髓細胞等的染色,。染前用蛋白酶等進行處理,,然后再用姬姆薩染液染色,在染色體上,,可以出現(xiàn)不同濃淡的橫紋樣著色,。
危險性:染料咽下可致命或引起眼睛失明,通過吸入和皮膚吸收是有毒的,。其危險是不可逆的效應,。
防護措施:戴合適的手套和安全護目鏡。在化學通風櫥里操作,,不要吸入其粉末,。
4.4 NaN3 疊氮化鈉
用途:疊氮化鈉,是一種無機化合物,,無味,無臭,,無吸濕性,,劇毒,溶于液氨和水,,是一種用于實驗防腐劑的抗微生物試劑,。
危險性:疊氮鈉是一種強烈的氧化劑和神經(jīng)毒劑,通常用于制備細胞減數(shù)分裂期的細胞核,。由于疊氮鈉具有毒性,,建議在使用時仔細評估其對特定細胞類型的影響,并在實驗中使用適當?shù)臐舛群涂刂平M,。它可因吸入,、咽下或皮膚吸收而損害身體健康,。
防護措施:配戴合適的手套和安全護目鏡,操作時要格外小心,。
5 電泳類
5.1 溴化乙錠(Ethidium Bromide,,簡稱EB)
用途:EB是一種常用于瓊脂糖凝膠電泳中核酸染色的熒光染料,用于觀察瓊脂糖和聚丙烯酰胺凝膠中的DNA,。
危險性:EB是強誘變劑,,具有高致癌性,會在60-70攝氏度時蒸發(fā),。因此在使用它時需要極其小心,,并采取適當?shù)陌踩胧越档捅┞讹L險,。
防護措施:由于溴化乙錠具有一定的毒性,,實驗結束后,應對含EB的溶液進行凈化處理再行棄置,,避免污染環(huán)境和危害人體健康,。
替代品:為了降低暴露風險,可以考慮使用較為安全的核酸染色劑替代EB,,例如SYBR Safe或GelRed等,。