細(xì)胞室是進行各種細(xì)胞培養(yǎng)的凈化級實驗室,,所有進入實驗室的人員都必須遵守實驗室有關(guān)的規(guī)章制度。?
第一章?總則?
第一條?細(xì)胞室主要由團隊內(nèi)相關(guān)科研人員使用,,原則上不對外開放,,其他人員如確實需使用細(xì)胞室必須預(yù)先征得實驗室負(fù)責(zé)人和細(xì)胞室負(fù)責(zé)人同意。
第二條?新養(yǎng)細(xì)胞的同學(xué),,需先跟隨由負(fù)責(zé)人指定的人員學(xué)習(xí),,熟記細(xì)胞室管理條例,最后通過細(xì)胞操作考核后,,方可進入細(xì)胞室進行實驗,。嚴(yán)禁未經(jīng)許可擅自進入細(xì)胞室或使用相關(guān)設(shè)備。?
第三條?細(xì)胞室正常使用過程中,,進出實驗室的器械和樣品需通過傳遞窗,,嚴(yán)禁隨身帶入。實驗用品應(yīng)盡量一次帶入,,嚴(yán)禁將與實驗無關(guān)的物品帶入實驗室,,在細(xì)胞室內(nèi)不得進行微生物等其它易污染物的培養(yǎng),禁止從事任何高危生化實驗,。?
第二章?條例?
第一條?常規(guī)操作?實驗人員必須在細(xì)胞室緩沖間內(nèi)更換細(xì)胞室專用隔離服,、拖鞋、并戴上口罩,,嚴(yán)禁不穿隔離服進入細(xì)胞室,、盡量避免在緩沖間走動、停留,。細(xì)胞室最多可4個人同時使用,。實驗過程中嚴(yán)禁喧嘩,閑聊,,反復(fù)進出培養(yǎng)室,。離開細(xì)胞室時應(yīng)在緩沖室填寫使用登記。
第二條?培養(yǎng)箱使用規(guī)則?
1.從培養(yǎng)箱取放物品前,,用酒精清潔雙手和手套,,盡量縮短開門時間和減少開門次數(shù)。(注:培養(yǎng)箱中的空氣是經(jīng)過過濾的潔凈空氣,。長時間敞開或頻繁開關(guān)培養(yǎng)箱,,容易造成污染。)?
2.從培養(yǎng)箱拿取細(xì)胞時輕拿輕放,,動作迅速,,隨手關(guān)緊培養(yǎng)箱門,。未經(jīng)允許,禁止翻看,、移動他人細(xì)胞或樣品,,如有特殊需要的,請聯(lián)系實驗室負(fù)責(zé)人協(xié)調(diào),。?
3.培養(yǎng)瓶/皿放入培養(yǎng)箱前,,用酒精消毒表面,并稍等至酒精揮發(fā)后再放入,,以免培養(yǎng)箱內(nèi)滯留過多乙醇蒸氣,。?
4.普通培養(yǎng)中的細(xì)胞,若非實驗特殊需要,,每瓶/板細(xì)胞每天只需要觀察生長狀態(tài)一次,,2人以上共用的細(xì)胞,可約好時間一起觀察,。(注:頻繁將細(xì)胞拿出觀察,,容易給培養(yǎng)箱造成污染,同時也會影響細(xì)胞生長條件的恒定,。)?
第三條?顯微鏡使用規(guī)則?
1.倒置相差顯微鏡使用前,,用酒精棉從中間至周圍擦拭載物臺。?
2.短時間內(nèi)需再次使用顯微鏡時,,為避免頻繁開關(guān)顯微鏡電源,,可不必關(guān)閉顯微鏡電源,但須將亮度旋鈕調(diào)到最低,;較長時間不需使用或離開細(xì)胞室時,,須按規(guī)定關(guān)閉顯微鏡電源。?第四條?超凈臺相關(guān)操作規(guī)則?
1.超凈臺使用遵循預(yù)約原則,。提前預(yù)約,細(xì)胞室內(nèi)填寫使用登記,。預(yù)約內(nèi)容請包括:預(yù)約時間,、姓名、使用日期,、使用時間段,、實驗內(nèi)容?。?
2.使用前,、后需用酒精棉球擦拭工作區(qū)消毒,,所有物品放入超凈臺內(nèi)使用前均應(yīng)消毒,超凈臺內(nèi)嚴(yán)禁堆放物品影響風(fēng)路平衡,,不同超凈臺內(nèi)物品嚴(yán)禁頻繁交換使用,。?
3.點燃酒精燈前需檢查瓶中酒精是否足夠,,液面應(yīng)占瓶高1/3-2/3。(注:消毒用75%的酒精,,酒精燈用95%以上的酒精,,使用前請留意)? ?? ?
4.超凈臺中應(yīng)擺放廢液缸,用于暫時存放廢棄物,,實驗結(jié)束后將廢液缸帶走,。(?注:液缸應(yīng)及時處理,嚴(yán)禁長時間放置,,以免留有大量培養(yǎng)液滋生細(xì)菌,。) ??
5.?細(xì)胞實驗后任何含有細(xì)胞培養(yǎng)污物的培養(yǎng)瓶,離心管,,移液管等必須及時帶出細(xì)胞室,。
第五條?器具的清洗規(guī)則
1.可回收的移液管、離心管,、培養(yǎng)瓶皿等,,放入裝有堿液的塑料桶中浸泡,桶內(nèi)需有足量的水以沒過浸泡物品,。(注:保證浸泡的瓶,、管內(nèi)完全被清水充滿。)
2.器具經(jīng)堿液侵泡過夜,,沖洗干凈并烘干后,,放入酸缸浸泡過夜,沖洗干凈并烘干,。洗滌程序:清水沖10次,,然后再用純水沖5次,倒置于烘箱中晾干,。并及時包裝滅菌,。?
第六條?冰箱、試劑等相關(guān)操作規(guī)則?
1.從冰箱取放物品動作要迅速,,關(guān)門時要檢查門是否關(guān)好,。按類別存放試劑。嚴(yán)禁長時間敞開冰箱門,。?
2.各人存放于冰箱內(nèi)的培養(yǎng)液,、生化試劑、樣品要注明姓名,、配制日期,、樣品名稱,特殊試劑需獲得細(xì)胞室管理人員同意后方能放置,。不得使用他人的培養(yǎng)液或其他生化試劑,。?
3.分裝好的血清長時間保存于-20℃,,使用前放于4 ℃預(yù)解凍。原則上解凍好的血清應(yīng)全部配成含血清的培養(yǎng)基備用,,若有剩余,,則暫存于4℃并盡快使用。盡量不要使用他人開過的血清,,以免交叉污染,。?
4.?細(xì)胞室的冰箱空間有限,盡量僅放置使用頻率較高的試劑,。請勿將一些閑置試劑,,污染試劑長期放置在此冰箱。?
5.負(fù)責(zé)人會定期對冰箱進行清理,,發(fā)現(xiàn)無標(biāo)記,,過期試劑等違規(guī)物品將全部清除出去,并且查找試劑配置人給予警告,。?
第七條?進入細(xì)胞室物品控制?
1.所有進入細(xì)胞室的物品需經(jīng)過傳遞窗,,盡量經(jīng)過紫外照射,酒精表面消毒,。?
2.嚴(yán)禁將可能含有污染物或病原菌的實驗物品帶入細(xì)胞室,。?
第八條?細(xì)胞室清潔守則?
1.?值日時間:每周周一開始,至周日結(jié)束,。?
2.日常工作:準(zhǔn)備75%和95%乙醇及棉球供細(xì)胞室使用,,倒廢液,維持細(xì)胞室的清潔與整潔,,主持細(xì)胞室塑料耗材的滅菌工作,,購買、分裝雙抗,,檢查培水浴鍋,、養(yǎng)箱內(nèi)水量是否足夠。?
3.每兩周大清潔:用新潔爾滅打掃細(xì)胞室,。? 清潔順序:0.1%新潔爾滅擦拭超凈臺,,桌面,傳遞窗,,超凈臺在用新潔爾滅擦拭后還需用75%乙醇擦一遍;用0.1%新潔爾滅拖地,,紫外線消毒細(xì)胞室30分鐘或過夜,。(注:值日期間,值日生需給水浴鍋,、培養(yǎng)箱水槽換水一次,,給細(xì)胞室內(nèi)的隔離服滅菌一次,。)?
4.?在沒有出現(xiàn)問題的情況下,每2個月清潔一次培養(yǎng)箱(由細(xì)胞室負(fù)責(zé)人主持),。
第九條?制度的實施與處罰?
1.細(xì)胞室負(fù)責(zé)人密切關(guān)注細(xì)胞室的使用情況,,發(fā)現(xiàn)違反規(guī)章操作者首先給予提醒,并做記錄,。?
2.對于一周內(nèi)違反3次以內(nèi)者予以警告,,3-5次者罰做細(xì)胞室清潔1周,超過5次者停止其對細(xì)胞室使用權(quán)限,,需重新參加培訓(xùn)后才能再次使用,。?
第三章?附則?
本規(guī)章制度從公布之日起開始執(zhí)行。本實驗室追求不斷地進步,,各位老師及使用人員若有良好的建議可與細(xì)胞室負(fù)責(zé)人溝通,,我們會及時協(xié)調(diào),旨在為團隊提供和諧,,高效的實驗條件,。